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冷凍組織研磨儀高效助力裸鼠腫瘤組織塊樣品蛋白的研磨提取實驗

更新時間:2024-04-02   更新時間:2024-04-02   點擊次數(shù):891次

  實驗目的:通過對裸鼠腫瘤組織樣品的前處理研磨破碎,提取樣品中的蛋白;再驗證通過外泌體干預的荷瘤鼠模型中,腫瘤的基因表達情況是否與蛋白測序結(jié)果一致。

  

  實驗設備:冷凍組織研磨儀 JXFSTPRP-CLN-48

  

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  裸鼠腫瘤組織樣品的前處理研磨實驗操作過程:

  

  1.將小鼠通過注射麻醉劑慢慢失去知覺后,對小鼠進行解剖取小鼠身上的腫瘤塊。

  

  2.取下腫瘤塊后在將腫瘤塊剪切成綠豆大小的塊狀,可先放入液氮或者-80℃的冰箱中方便后期研磨。

  

  3.冷凍研磨儀開機,先將儀器制冷功能打開,溫度設置成-20℃,保證樣品在研磨時蛋白不會發(fā)生裂解。

  

  4.研磨儀預設溫度達到后,將剛剛?cè)『眉羟泻蟮臉悠贩湃胙心ス苤?,每個研磨管盡量放100mg左右,再往研磨管中加入4顆研磨珠,再加入蛋白提取液蓋上研磨管蓋,進行濕磨。將研磨管放入適配器中,適配器再固定到研磨儀上。

  

  5.設置研磨儀參數(shù),設置好研磨頻率和時間,研磨次數(shù)2次,研磨中斷時間15s,經(jīng)過研磨后,再進行蛋白的提取。

  

  實驗前處理研磨操作注意事項:

  

  1、研磨管放到適配器上,一定要注意研磨管的平面配平,否則會損壞研磨儀的寶塔。

  

  2、適配器在放到研磨儀寶塔上時,固定螺母一定要固定緊,否則既會損壞研磨儀寶塔,還會對適配器底部造成損壞。

  

  裸鼠腫瘤組織樣品的前處理研磨實驗前后效果圖:

  

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  實驗結(jié)果:裸鼠腫瘤組織樣品在經(jīng)過冷凍組織研磨儀儀的前處理研磨實驗應用后,其對裸鼠腫瘤組織樣品提取的蛋白含量充足;且低溫冷凍的實驗環(huán)境也為蛋白質(zhì)活性的保留、核酸降解的抑制得到的有效解決。


  冷凍組織研磨儀能在非常短的時間內(nèi)將土壤、植物和動物的組織,器官等樣品完成研磨、粉碎。隨著近代醫(yī)學的發(fā)展,特別是腫瘤學和免疫學的需要,動物組織的研磨已經(jīng)成為了實驗室不可少的一個環(huán)節(jié)。JXFSTPRP-CLN-48低溫研磨樣品,實現(xiàn)無交叉污染的同時,低溫研磨樣品能夠有效抑制核酸降解、保留蛋白質(zhì)活性。是實驗室樣品前處理的好幫手。

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